Luciferin - люциферазанын экспрессиясын in vitro сүрөттөө үчүн колдонулган кадимки биолюминесценттик кабарчы. Firefly luciferase ферменти үчүн бул сууда эрүүчү субстрат (адатта Photinus pyralisден алынган) кычкылтектин катышуусунда мүнөздүү сары-жашыл эмиссияны чыгаруу үчүн ко-факторлор катары ATP жана Mg2+ колдонот.
D-Luciferin эмне кылат?
Luciferin luciferase экспрессиясын in vivo сүрөттөө үчүн колдонулган кадимки биолюминесценттик кабарчы. Отто люцифераза ферменти үчүн бул сууда эрүүчү субстрат кычкылтектин катышуусунда мүнөздүү сары-жашыл эмиссияны чыгаруу үчүн кофакторлор катары ATP жана Mg2+ колдонот., ал 37°Cде in vivo кызыл жарыкка өтөт.
D-Luciferin калий деген эмне?
Чоо-жайы. D-Luciferin калий тузу фермент Firefly Luciferase үчүн пайдалуу субстрат болуп саналат. Люцифераза ферменти менен кычкылданганда биолюминесценция пайда болот. D-Luciferin кызыктырган промотер менен байланышкан люцифераза генинин экспрессиясын анализдөө үчүн колдонулушу мүмкүн.
Д-Люциферинди кантип жасайсыз?
1. Стерилдүү сууга 200X luciferin запас эритмеси (30 мг/мл) даярдаңыз. Люциферин толук эригенге чейин инверсия менен акырын аралаштырыңыз. Дароо колдонуңуз же келечекте колдонуу үчүн -20°C градуста тоңдуруңуз.
Люциферинди кантип сайасыз?
(Люциферин адатта интраперитоналдык же венага берилет.) Мисал: 10 мкл менен сайыъызДене салмагынын грамына люциферин запас эритмеси (кадимки 150 мг/кг инъекция үчүн 20 г чычкан үчүн ~ 200 мкл). 5. Максималдуу люцифераза сигналынын платосу үчүн сүрөткө чейин 10-20 мүнөт күтө туруңуз.
