Өткөн жылдарда Кориэлл жаңы төрөлгөн торпоктун сывороткасында табылган комплемент протеинди инактивациялоо үчүн өзүнүн клетка культуралары үчүн бардык жылуулук менен активдештирилген сывороткаларды колдонгон. Түйүлдүктүн сывороткасы болуп өзгөргөндүктөн, жылуулукту инактивациялоо керек эмес клетка линияларынын көбү үчүн.
Активсиз FBSти канчага чейин жылытасыз?
Төмөнкү протокол түйүлдүк бодо малдын сывороткасын (FBS) жылуулук менен инактивациялоо үчүн сунушталат. FBS 56± 2°C чейин ысытылат 30±2 мүнөт агитациялоочу суу ваннасында. Жылуулукту инактивациялоо (HI) – FBS 56± 2° температурада 30± 2 мүнөт сакталган процесс.
Колдонуудан мурун эмне үчүн FBS үчүн жылуулукту инактивациялоо керек?
ФБСтин кеңири таралган дарылоосу – жылуулук-инактивациялоо, мында FBS маал-маалы менен чайкалып турган суу мончосунда 56°C 30 мүнөт ысытылат. Максаты - FBS [24] ичинде комплемент системасынын бардык компоненттерин жана клетканын өсүшүнүн башка потенциалдуу белгисиз ингибиторлорун активдештирүү.
Эмне үчүн сыворотканы ысытуу керек?
Жылуулукту инактивациялоонун максаты продукциянын өсүшүнө көмөктөшүүчү өзгөчөлүктөргө таасир этпестен, сывороткадагы комплементтин активдүүлүгүн жок кылуу. Сывороткадан комплементтин активдүүлүгүн алып салуу көпчүлүк клетка культуралары үчүн талап кылынбайт, бирок комплементтин активдүүлүгүнө сезгич культуралар үчүн зарыл болушу мүмкүн.
Жылуулуктан ажыратылган FBSти кантип сактайсыз?
Эриген FBS жана башка сыворотканы коопсуз муздаткыч менен коргоңуз жанасактоо. Эриген сыворотканы тезинен колдонуңуз. Суюк FBS жана башка сывороткаларды муздаткычта (2…8 °C) сактоого болот төрт жумага чейин.
