Ошондой эле үлгүңүздү мурунку көлөмдүн ондон 1 бөлүгүнө чейин ультрафильтрациялоо жолу менен тузсуздандырып, кайра суюлтуп, UF кадамын кайталасаңыз болот. Туздан тазалоонун эң жакшы ыкмасы ультра фильтрацияга (классикалык, центрифугалык эмес) караганда, 50 мМ буфергекаршы гелди чыпкалоо аркылуу тузсуздандыруу.
Белок тазалоодо тузсуздандыруу деген эмне?
Тузсыздандыруу белок эритмелеринен туздарды, фенолду же нуклеиндик кислоталардан корпорацияланбаган нуклеотиддерди же конъюгацияланган протеиндердин ашыкча кайчылаш же белгилөө реагенттерин алып салуу үчүн колдонулат.
Белокторду кантип тазалайсыз?
Протеиндерди жапырт тазалоодо протеиндерди изоляциялоонун жалпы биринчи кадамы - аммоний сульфаты менен чөгүрүү (NH4) 2SO4. Бул аммоний сульфатын көбөйтүү жана чөктүрүлгөн протеиндин ар кандай фракцияларын чогултуу аркылуу ишке ашырылат. Кийинчерээк аммоний сульфатын диализ аркылуу алып салууга болот.
Алмашуу белокторун кантип буфер кыласыз?
Буфер алмашуу, бирок биринчи эквилибрациялоо менен мамычанын чайырын үлгү бүтүшү керек буфер менен ишке ашырат. Эки учурда тең үлгүнү алып жүрүүчү буфердин компоненттери мамыча алдын ала теңдештирилген чечим менен алмаштырылат.
Төмөнкү хроматография техникасынын кайсынысын белокторду тузсуздандыруу үчүн колдонсо болот?
Жогоруда айтылгандай, гель фильтрация белок үчүн эффективдүү колдонулушу мүмкүнтузсуздандырат жана адегенде гель фильтрациялоо колонкасын суу менен тең салмактоо аркылуу ишке ашырылат. Бирок буфер алмашуу алгач мамычанын чайырын максаттуу буфер менен теңдештирүү аркылуу ишке ашат.
