2024 Автор: Elizabeth Oswald | [email protected]. Акыркы өзгөртүү: 2024-01-13 00:09
Ошондой эле үлгүңүздү мурунку көлөмдүн ондон 1 бөлүгүнө чейин ультрафильтрациялоо жолу менен тузсуздандырып, кайра суюлтуп, UF кадамын кайталасаңыз болот. Туздан тазалоонун эң жакшы ыкмасы ультра фильтрацияга (классикалык, центрифугалык эмес) караганда, 50 мМ буфергекаршы гелди чыпкалоо аркылуу тузсуздандыруу.
Белок тазалоодо тузсуздандыруу деген эмне?
Тузсыздандыруу белок эритмелеринен туздарды, фенолду же нуклеиндик кислоталардан корпорацияланбаган нуклеотиддерди же конъюгацияланган протеиндердин ашыкча кайчылаш же белгилөө реагенттерин алып салуу үчүн колдонулат.
Белокторду кантип тазалайсыз?
Протеиндерди жапырт тазалоодо протеиндерди изоляциялоонун жалпы биринчи кадамы - аммоний сульфаты менен чөгүрүү (NH4) 2SO4. Бул аммоний сульфатын көбөйтүү жана чөктүрүлгөн протеиндин ар кандай фракцияларын чогултуу аркылуу ишке ашырылат. Кийинчерээк аммоний сульфатын диализ аркылуу алып салууга болот.
Алмашуу белокторун кантип буфер кыласыз?
Буфер алмашуу, бирок биринчи эквилибрациялоо менен мамычанын чайырын үлгү бүтүшү керек буфер менен ишке ашырат. Эки учурда тең үлгүнү алып жүрүүчү буфердин компоненттери мамыча алдын ала теңдештирилген чечим менен алмаштырылат.
Төмөнкү хроматография техникасынын кайсынысын белокторду тузсуздандыруу үчүн колдонсо болот?
Жогоруда айтылгандай, гель фильтрация белок үчүн эффективдүү колдонулушу мүмкүнтузсуздандырат жана адегенде гель фильтрациялоо колонкасын суу менен тең салмактоо аркылуу ишке ашырылат. Бирок буфер алмашуу алгач мамычанын чайырын максаттуу буфер менен теңдештирүү аркылуу ишке ашат.
Сунушталууда:
Чийки тузсуздандыруу деген эмнени билдирет?
Тузсыздандыруу ысытылган чийки майды жууган сууга аралаштырууну, чийки май менен суунун туура байланышын камсыз кылуу үчүн аралаштыргыч клапанды же статикалык аралаштыргычты колдонууну, андан кийин аны сууга өткөрүүнү камтыйт. суулуу жана органикалык фазалардын туура бөлүнүшүнө жетишилген бөлүүчү идиш.
Белокту сиңирүү эмнеден башталат?
Белокту сиңирүү биринчи чайнап баштаганда башталат. Шилекейиңизде амилаза жана липаза деп аталган эки фермент бар. Алар негизинен углеводдорду жана майларды ыдырат. Белок булагы ашказаныңызга жеткенде, туз кислотасы жана протеазалар деп аталган ферменттер аны аминокислоталардын майда чынжырларына ажыратат.
Белокту эмне денатуралай алат?
Белоктар щелочтуу же кислота, кычкылдандыруучу же калыбына келтирүүчү агенттер жана кээ бир органикалык эриткичтер менен дарылоо аркылуу денатураталанат. Денатурациялоочу агенттердин арасында негизги структурага таасир этпестен, экинчилик жана үчүнчү даражадагы түзүлүшкө таасир эткендер кызыктуу.
Белокту кантип гидролиздейсиз?
Белоктар, адатта, 24 саат бою 6N HCl эритмеси менен "ЖАПКАН" түтүкчөлөрүндө 24 саат бою түзүүчү аминокислоталарга чейин гидролизденет. Гидролиздин аягында кислота вакуумда буулантуу жолу менен алынат. 6% тиогликол кислотасын кошуу гидролиз учурунда триптофан калдыктарын толук жок кылуудан коргоого жардам берет.
Ультрадыбыс менен белокту жок кыла алабы?
соникация протеиндерди деградациялап, протеин эпитопторун денатурат кылышы мүмкүн болгондуктан, биз кийинки жолу Ультрадыбыс менен протеиндин бүтүндүгүнө таасирин бааладык. Ультрадыбыс менен протеиндерге зыян келтире алабы? Популярдуу жооптор (1) Стандарттуу Ультрадыбыс менен иштөө протоколу тескерисинче, белоктун фрагментациясына алып келбейт- энергия өтө төмөн.
